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人單個核細胞分離液1.077

  • 產品型號╃│✘:S101-100,S101-250
  • 產品時間╃│✘:2020-07-13
  • 簡要描述╃│✘:產品概述╃│✘:
    本產品是一種用於分離人外周血單個核細胞的無菌◕↟、低內毒素水平的密度梯度分離液✘☁·•▩。外周血中單個核細胞(PBMC)包括淋巴細胞和單核細胞₪│,其體積◕↟、形態和密度與其他細胞不同₪│,紅細胞和粒細胞密度較大₪│,1.090g/mL 左右₪│,淋巴細胞和單核細胞密度為 1.075~1.090g/mL₪│,血小板為1.030~1.035g/mL✘☁·•▩。為此利用一種密度介於 1.075~1.092 之間而近於等滲的
  • 產品簡介

儲存╃│✘:

本產品對光敏感₪│,應該室溫避光儲存₪│,保質期 2 年✘☁·•▩。無菌開封后₪│,保存於室溫✘☁·•▩。

 

使用說明╃│✘:

 

 

1. 取新鮮抗凝全血(EDTA◕↟、枸櫞酸鈉或肝素抗凝均可)₪│,用等體積的全血及組織稀釋液或者PBS稀釋全血✘☁·•▩。
2. 在離心管中加入適量分離液(當稀釋後血液體積小於3mL時₪│,加入3mL分離液;大於等於3mL₪│,加入等體積分離液✘☁·•▩。但二者的總體積不能超過離心管的三分之二₪│,否則會影響分離效果)₪│,將稀釋後的血液平鋪到分離液液麵上方₪│,注意保持兩液麵介面清晰✘☁·•▩。(可以使用巴氏德吸管吸取血液₪│,然後將血液小心的平鋪於分離液上₪│,因為兩者的密度差異₪│,將形成明顯的分層介面✘☁·•▩。如果樣品較多加樣時間較長₪│,在離心之前會出現紅細胞成團下沉屬正常現象✘☁·•▩。)
 

3. 室溫₪│,水平轉子500~1000g₪│,離心20~30min(血液的體積越大所需的離心力越大₪│,離心時間越長₪│,很好的分離條件需摸索₪│,離心轉速大不超過1200g)✘☁·•▩。
 

4.離心後將出現明顯的分層╃│✘:上層是稀釋的血漿層₪│,中間是透明的分離液層₪│,血漿與分離液之間的白膜層即為單個核細胞層₪│,離心管底部是紅細胞與粒細胞

5. 小心的吸取白膜層細胞到15mL潔淨的離心管中₪│,10mL PBS或細胞洗滌液洗滌白膜層細胞✘☁·•▩。250g₪│,離心10min✘☁·•▩。
6. 棄上清₪│,5mL的PBS或細胞清洗液重懸細胞₪│,250g₪│,離心10min✘☁·•▩。
7. 重複步驟6
8. 棄上清₪│,細胞重懸備用✘☁·•▩。

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